ऊतक एम्बेडर

अनुचित अभिविन्यास से स्लाइड पर अव्यवस्थित रूप से व्यवस्थित हिस्टोलॉजिकल विशेषताएं हो जाएंगी। उदाहरण के लिए, त्वचा को उन्मुख करते समय, नमूने को इस तरह रखा जाना चाहिए कि उपकला किनारों, चमड़े के नीचे के ऊतक और गहरी परतें, नीचे की ओर संरेखित हों ताकि तैयार स्लाइड में स्तर दिखाई दे। एक से अधिक नमूने एम्बेड करते समय, ऊतक के सभी टुकड़ों को कंटेनर के नीचे मजबूती से एम्बेड किया जाना चाहिए ताकि कटा हुआ भाग प्रस्तुत किए गए ऊतक की एक वैध प्रस्तुति प्रस्तुत कर सके।

अनुचित अभिविन्यास के कारण कलाकृतियाँ एम्बेडिंग प्रक्रियाओं के दौरान अक्सर सामने आती हैं जिससे माइक्रोटोम को नुकसान हो सकता है, अनुभाग फट सकता है जिससे ऊतक का सूक्ष्म अध्ययन मुश्किल हो जाता है। इसका परिणाम यह है कि कॉज़ लॉन्ग टर्नअराउंड टाइम (टीएटी) को फिर से एम्बेड करने की आवश्यकता है।

पैराफिन मोम ऊतक एम्बेडिंग के सबसे महत्वपूर्ण तत्वों में से एक है और इसकी गुणवत्ता एक ब्लॉक के उत्पादन के लिए मौलिक है। ऊतक विरूपण को कम करने और असाधारण संपीड़न प्रतिरोध और रिबन निरंतरता प्रदान करने के लिए पैराफिन मोम फॉर्मूलेशन को लगातार गुणवत्ता और निर्भरता के साथ विकसित किया जाना चाहिए। विभिन्न पैराफिन में विभिन्न प्रकार के सेट-पॉइंट तापमान, एडिटिव्स और विशेषताएं होती हैं, आपके प्रसंस्करण, एम्बेडिंग और सेक्शनिंग आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए एक पैराफिन होता है - इसलिए अपनी आवश्यकताओं पर सावधानीपूर्वक विचार करें और अपना शोध करें।

उदाहरण के लिए, सामान्य ऊतक एम्बेडिंग के लिए पैराप्लास्ट रेगुलर की अनुशंसा की जाती है। यह विनियमित आणविक भार के प्लास्टिक पॉलिमर युक्त अत्यधिक शुद्ध पैराफिन के परिष्कृत मिश्रण से बना है। यह बेहतर ऊतक घुसपैठ और न्यूनतम संपीड़न के साथ बेहतर गुणवत्ता वाले अनुभागों का समर्थन करता है।

हिस्टोटेक में अशुद्धियाँ भी आ सकती हैं। सफेद फ़्लॉकस जैसी अशुद्धियाँ प्रकट नहीं होनी चाहिए। सफेद फ़्लॉकस की उपस्थिति पैराफिन में अत्यधिक समाशोधन एजेंट का संकेत देती है। इससे बचने के लिए, उस आवृत्ति को बढ़ाएं जिसमें आप पैराफिन को बदलते हैं। अलावा; माइक्रोटॉमी के दौरान ऊतक को ब्लेड से समान रूप से विभाजित करने के लिए जितना संभव हो उतना सपाट बनाने के लिए बोल्ट जैसी संरचना सामग्री का उपयोग करने की अत्यधिक अनुशंसा की जाती है।

यद्यपि यह इतना सामान्य मुद्दा नहीं है, विश्लेषण के लिए चयनित ऊतकों के आकार की योजना बनाने के लिए रोगविज्ञानी या रोगविज्ञानी सहायक (पीए) द्वारा विभिन्न आकारों के सांचों की उपलब्धता का ज्ञान पहले से समझना महत्वपूर्ण है (नमूना मोटाई देखें), और वही है संसाधित किए जाने वाले ऊतकों के लिए कैसेट के चयन के लिए सही है। कुछ कैसेटों में बहुत छोटे छेद होते हैं जो ऊतक ब्लॉकों के निर्माण के लिए एम्बेडिंग माध्यम से गुजरने में कठिनाई पैदा करते हैं। दूसरों में बहुत बड़े छेद होते हैं, जिसके परिणामस्वरूप ऊतक प्रसंस्करण के दौरान छोटे ऊतक या टुकड़े खो सकते हैं।

एम्बेड करते समय ऊतक विज्ञान प्रयोगशाला पेशेवर की देखने की क्षमता के कारण बिना एंबेड किए छोड़े गए छोटे ऊतक नष्ट हो सकते हैं। यही कारण है कि आधुनिक एम्बेडिंग केंद्र हटाने योग्य/गैर-हटाने योग्य आवर्धक ग्लास के साथ उपलब्ध हैं। अच्छी रोशनी वाला कार्य क्षेत्र भी महत्वपूर्ण है और ये एम्बेडिंग केंद्र और एलईडी लाइटें भी उपलब्ध हैं।

ऊतकों को विभिन्न तरीकों से स्वीकार किया जा सकता है और लागत इन तरीकों के अनुरूप होती है।
ताजा ऊतक:यदि ताजा ऊतक जमा किया जाता है, तो इसे प्रसंस्करण से पहले रात भर के लिए 10% न्यूट्रल बफर्ड फॉर्मेलिन में रखा जाएगा।
स्थिर ऊतक:हम ऐसे ऊतक को स्वीकार करते हैं जिसे विभिन्न प्रकार के फिक्सेटिव्स में स्थिर किया गया है। एक बार निर्धारण पूरा हो जाने पर, कृपया नमूनों को 70% इथेनॉल में स्थानांतरित करें।
कैसेट में स्थिर ऊतक:वांछित दिशा सुनिश्चित करने के लिए ग्राहकों को अपने टिश्यू को कैसेट में रखने का स्वागत है।

निम्नलिखित हमारे ग्राहकों के उपयोग के लिए उपलब्ध हैं और E1515 में पिक-अप के लिए उपलब्ध हैं:
10% न्यूट्रल बफर्ड फॉर्मेलिन (एनबीएफ)
कैसेट (शुल्क के लिए)
बायोप्सी रैप्स/कैसेट

ऊतक को इच्छानुसार ठीक करें:आपके ऊतकों में फिक्सेटिव को प्रवेश करने के लिए ~1 मिमी/घंटा का समय दें और टिश्यू में फिक्सेटिव वॉल्यूम का 10-20 गुना वॉल्यूम डालें।
लेबल कैसेट:कैसेट पर लेबल लगाते समय, कैसेट के लिए केवल एक अभिकर्मक प्रतिरोधी मार्कर (उदा: स्टेटमार्क पेन) या #2 हार्ड लेड पेंसिल का उपयोग करें, कभी भी पेन या शार्पी मार्कर का उपयोग न करें। प्रसंस्करण में उपयोग किए जाने वाले सॉल्वैंट्स कई "स्थायी" शार्पी मार्करों से स्याही को हटा सकते हैं।
सुनिश्चित करें कि छोटे टुकड़े नष्ट न हों:प्रसंस्करण के दौरान छोटे ऊतकों को नष्ट होने से बचाने के लिए बायोप्सी कैसेट में रखें या फिल्टर पेपर में लपेटें। ऊतक प्रोसेसर घुसपैठ को सुविधाजनक बनाने के लिए वैक्यूम का उपयोग करता है जो कैसेट से ऊतक को हटा सकता है।
वांछित दिशा में कैसेट में रखें:जब ऊतक को कैसेट में रखा जाता है तो ऊतक की सतह जो कैसेट में नीचे रखी जाती है, उसे एम्बेडिंग के लिए नीचे रखा जाएगा और यह वह सतह है जिसे पहले खंडित किया जाता है। कृपया सबमिशन फॉर्म पर किसी विशेष एम्बेडिंग अनुरोध को सूचीबद्ध करें।
नमूनों को टाइट फिटिंग वाले ढक्कन वाले स्पिल रूफ कंटेनर में रखें। सुनिश्चित करें कि सभी ऊतक और कैसेट पूरी तरह से 70% इथेनॉल में डूबे हुए हैं ताकि नमूने सूखें नहीं।
परिवहन कंटेनर को लेबल करें:कृपया पीआई का नाम, शोधकर्ता (जमाकर्ता) का नाम, समाधान और तारीख शामिल करें।
आरएचएस को नमूने और सबमिशन फॉर्म प्रदान करें। नमूना पहचान को सूचीबद्ध करने के लिए एक अलग शीट भी प्रदान की जाती है।

ऊतकों को विभिन्न तरीकों से स्वीकार किया जा सकता है और लागत इन तरीकों के अनुरूप होती है।
धीरे-धीरे जमने के बजाय तेजी से जमने से ऊतक में बर्फ के क्रिस्टल का निर्माण कम हो जाता है।
ताजा ऊतक:यदि ताजा ऊतक प्रस्तुत किया जाता है, तो बिना निर्धारण के तेजी से जमे हुए।
स्थिर ऊतक:हम ऐसे ऊतक को स्वीकार करते हैं जिसे विभिन्न प्रकार के फिक्सेटिव्स में स्थिर किया गया है। कुछ ग्राहक जमने से पहले अपने नमूने सुक्रोज ग्रेडिएंट के माध्यम से तैयार करना चुनते हैं। एक बार ऊतक तैयार हो जाने पर, कृपया नमूनों को आरएचएस में डिलीवरी से पहले 30% सुक्रोज में स्थानांतरित करें।
ओसीटी साँचे में जमे हुए ब्लॉक: वांछित अभिविन्यास सुनिश्चित करने के लिए ग्राहकों को अपने स्वयं के नमूनों को फ्रीज करने के लिए स्वागत है। जमे हुए ब्लॉकों को सेक्शनिंग/आगे की प्रक्रिया के लिए आरएचएस को प्रदान किया जा सकता है।

एक पूर्व-लेबल ऊतक मोल्ड OCT एम्बेडिंग यौगिक से एक तिहाई भरा होता है।
जमने से पहले ऊतक को धीरे से पोंछकर बाहरी तरल पदार्थ से मुक्त कर देना चाहिए।
ऊतक का नमूना ऊतक के साँचे में उन्मुख होता है (ऊतक के किनारे और साँचे के किनारे के बीच की दूरी बनाए रखी जानी चाहिए)
ऊतक मोल्ड का शेष भाग OCT एम्बेडिंग माध्यम से भरा होता है। सुनिश्चित करें कि नमूना पूरी तरह से OCT से घिरा और ढका हुआ है।
ऊतक के सांचे को पूरी तरह से जमने तक तरल नाइट्रोजन स्नान पर तैराया जाता है। OCT दृढ़ और अपारदर्शी/सफ़ेद होगा।
तरल नाइट्रोजन से मोल्ड निकालें और पन्नी में कसकर लपेटें।
पन्नी में लिपटे नमूने को प्लास्टिक बैग में रखें जिस पर नमूने की पहचान और तारीख का उचित लेबल लगा हो। कृपया पीआई का नाम, शोधकर्ता (जमाकर्ता) का नाम, समाधान और तारीख शामिल करें।
ऊतक को -80 C पर संग्रहित किया जाना चाहिए और सूखी बर्फ पर आरएचएस तक पहुंचाया जाना चाहिए।
आरएचएस को नमूने और सबमिशन फॉर्म प्रदान करें। नमूना पहचान को सूचीबद्ध करने के लिए एक अलग शीट भी प्रदान की जाती है।